基础医学论文_4型流感病毒疫苗株在MDCK细胞中
文章目录
1 材料与方法
1.1 细胞株及病毒株
1.2 实验动物
1.3主要试剂及仪器
1.4 细胞培养
1.5 4型流感病毒在两种细胞中增殖条件的优化
1.6 病毒血凝滴度检测
1.7 病毒滴度检测
1.8 4型流感病毒在两种细胞中培养引起CPE敏感性的比较
2 结果
2.1 两种细胞生长曲线的比较
2.2 4型流感病毒在两种细胞中增殖条件的优化
2.2.1 血凝滴度的比较
2.2.2 最适种毒条件
2.2.3 血凝滴度的比较
2.2.4 病毒滴度的比较
2.3 4型流感病毒在两种细胞中培养引起CPE敏感性的比较
3 讨论
文章摘要:目的优化4型流感病毒疫苗株H1N1(IVR-215)、H3N2(NIB-121)、BV(BVR-11)、BY(BVR-1B)在稳定表达牛胰蛋白酶原的MDCK细胞(MTY6)和MDCK细胞中的增殖条件,并比较MTY6和MDCK细胞培养不同型别流感病毒的差异。方法以血凝滴度和病毒滴度[半数组织感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID50)]为指标,通过棋盘法对4型流感病毒疫苗株在MTY6和MDCK细胞上种毒的MOI(10-1、10-2、10-3、10-4)、胰酶终浓度(0.5、1、1.5、2μg/mL)及收毒时间(0、24、48、72、96 h)进行优化;以接毒后细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)为指标,分析两种细胞对不同型别流感病毒的敏感性。结果 H1N1、H3N2、BV和BY株病毒在MTY6细胞中培养的最适MOI分别为10-4、10-4、10-2、10-2,胰酶终浓度分别为0.5、1、0.5、0.5μg/mL,收毒时间分别为96、72、48、72 h。H1N1、H3N2、BV和BY株病毒在MDCK细胞中培养的最适MOI均为10-4,胰酶浓度为0.5、1、0.5和1.5μg/mL,收毒时间为96、48、72和72 h。4型流感病毒疫苗株在MTY6细胞中培养比在MDCK细胞中具有更高的血凝滴度和TCID50。在相同时间内,H1N1、H3N2、BY株病毒在MTY6细胞中比在MDCK细胞中能够引起更明显的CPE。结论成功优化了4型流感病毒疫苗株在MTY6细胞中的增殖条件,MTY6细胞与MDCK细胞相比,培养4型流感病毒疫苗株能够获得更高的病毒滴度,并增加病毒产量。本研究为MTY6细胞用于流感疫苗生产奠定了基础。
文章关键词:
论文作者:江征 张国梅 张哲罡 邓涛 刘京 吕传硕 乐洋 马宁 周蓉 张家友 李长贵 杨晓明
论文DOI:10.13200/j.cnki.cjb.003441
论文分类号:R392
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