文章目录

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 病毒

1.3 主要试剂及仪器

1.4 溶液配制

1.5 地鼠用量及接种病毒时间确定

1.6 病毒收获时间及次数确定

    1.6.1 细胞工厂实验组（工厂01～05)

    1.6.2 10 L转瓶对照组（转瓶01)

1.7 编码主要保护性抗原核酸的遗传稳定性检测

1.8 原液制备及检定

2 结果

2.1 最适地鼠用量及接种病毒时间

2.2 病毒收获时间及次数

2.3 原液检定结果

3 讨论

文章摘要:目的应用细胞工厂代替转瓶,培养原代地鼠肾细胞制备森林脑炎灭活疫苗,建立连续培养多次收获工艺,以提高疫苗产量。方法采用40层细胞工厂培养地鼠肾细胞,确定最佳细胞培养条件。用森林脑炎病毒森"张"株感染细胞,连续收获病毒液,经超滤浓缩、灭活、柱层析纯化后获得疫苗原液,按照《中国药典》三部（2015版）进行相关检测。结果确定了细胞工厂制备森林脑炎灭活疫苗的工艺参数:细胞工厂最适细胞接种量为3～4对地鼠肾/层;感染病毒96 h后第1次收获,之后每48 h收获1次,可连续收获3～5次。原液中抗原含量、蛋白质含量、地鼠肾细胞蛋白质残留量、牛血清白蛋白残余量均符合《中国药典》三部（2015版）规定。结论利用细胞工厂培养原代地鼠肾细胞制备森林脑炎灭活疫苗,获得了较高的细胞密度并收获了高毒力的病毒液,可替代转瓶培养工艺大规模制备森林脑炎灭活疫苗。

文章关键词:

论文作者:张朔 赵建 邹墅 张颖 赵东山 刘晓杰 刘玥 翟东颖 孙宏亮 

论文DOI:10.13200/j.cnki.cjb.003440

论文分类号:R392-3